Dalyviai startuos Nepriklausomybės aikštėje bei važiuos Gedimino prospektu (nuo Lietuvos Respublikos Seimo rūmų), toliau trasą tęs Šventaragio, T. Vrublevskio, Arsenalo, T. Kosciuškos gatvėmis, privažiavus iki transporto žiedo apsisuks ir važiuos tomis pačiomis gatvėmis atgal per Karaliaus Mindaugo tiltą, Žvejų, Upės, Vytauto ir A. Mickevičiaus gatvėmis, per Žvėryno tiltą, A. Goštauto gatve iki Baltojo tilto ir atgal A. Goštauto gatve bei Gedimino prospektu iki Nepriklausomybės aikštės.
Rugpjūčio 23 d. nuo 4.30 iki 19.00 val. visoje dviračių maratono trasoje bus draudžiamas transporto ir viešojo transporto eismas, taip pat trasoje bus draudžiama statyti transporto priemones.
Renginio metu numatomi ir viešojo transporto maršrutų trasų bei tvarkaraščių pakeitimai: keisis 1G, 3G ir 6G greitųjų autobusų maršrutų trasos, 10, 11, 22, 33, 40, 43, 46, 52, 53, 56, 73, 88 ir 89 autobusų maršrutų trasos bei 2, 3, 4, 6 ir 20 troleibusų maršrutų trasos, o nuo 4:30 iki 19 val. nevažiuos 10, 12, 14 ir 17 maršrutų troleibusai. Vietoje 17 maršruto troleibusų minėtu laiku dažniau kursuos 9 maršruto troleibusai.
Be to, keleivių patogumui prie Žirmūnų tilto, arčiau žiedinės Olandų g. sankryžos, bus įrengtos laikinos viešojo transporto stotelės Šv. Petro ir Povilo bažnyčia (abiem kryptimis). Šiose stotelėse stos 1G, 6G, 10, 33, 40, 43, 46, 53 maršrutų autobusai ir 2, 4, 20 maršrutų troleibusai.
Eismo dalyvių prašoma būti atidiems, laikytis kelių eismo taisyklių ir eismo reguliuotojų nurodymų, o kelionės sostinėje trukmę rugpjūčio 23 d. planuotis nusimatant laiko atsargą.